慢病毒包装

服务介绍
    慢病毒包装是慢病毒(Lentivirus)载体的构建过程重要的一环。慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)来源的一种病毒载体,慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装成为有感染力的病毒颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在细胞或活体组织中表达。

服务流程
1、目的基因克隆
2、慢病毒质粒载体构建
3、质粒载体大量抽提
4、载体大量包装与浓缩
5、滴度测定
6、获取稳定感染株
7、目的基因效率鉴定

客户提供
1、目的基因的名称、种属、序列或GeneBank Accession Number
2、对启动子和标记基因的要求信息
3、若需要检测靶基因的表达,需提供相应抗体或由公司代购

交付内容
1、1 ml慢病毒液和阴性对照100 μl,滴度大于等于1×108-9 UT/ml。
2、实验报告:详细操作步骤、质粒图谱、构建载体的测序报告、病毒鉴定数据,滴度测定报告及相关的外源基因表达分析。

项目列表

基因上调
项目 内容 周期
慢病毒质粒载体构建 从克隆载体中提取基因,克隆,载体构建,测序正确 20个工作日
慢病毒包装 抽提、包装与浓缩、滴度测定 15个工作日
获取稳定感染株 将慢病毒感染目的细胞,并通过嘌啉霉素筛选出稳定感染株 20个工作日
目的基因上调效率鉴定 通过western blot鉴定目的基因上调效率 10个工作日
 
基因下调
项目 内容 周期
慢病毒穿梭载体构建 将三条shRNA分别构建至慢病毒干扰载体,测序成功 20个工作日
病毒包装 抽提、包装与浓缩、滴度测定 15个工作日
获取稳定感染株 将慢病毒感染目的细胞,并通过嘌啉霉素筛选出稳定感染株,目的细胞由客户提供 20个工作日
目的基因干扰效率鉴定 通过western blot鉴定目的基因上调效率 10个工作日
 













慢病毒载体图

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